超微量分光光度計(jì)憑借僅需0.5–2μL樣品、無(wú)需比色皿、快速檢測(cè)核酸/蛋白濃度與純度的優(yōu)勢(shì)，已成為分子生物學(xué)、基因組學(xué)及生物制藥實(shí)驗(yàn)室的標(biāo)配設(shè)備。因其依賴液滴表面張力形成光路，對(duì)操作潔凈度與環(huán)境極為敏感，可能會(huì)出現(xiàn)讀數(shù)漂移、A260/A280異常、基線噪聲大或液滴塌陷等問(wèn)題?？茖W(xué)識(shí)別并精準(zhǔn)處置
超微量分光光度計(jì)故障，是保障數(shù)據(jù)可靠性的關(guān)鍵。
一、核酸濃度偏低或無(wú)讀數(shù)
原因分析：
樣品未正確置于檢測(cè)pedestal（上下光纖端面）；
液滴體積不足（＜0.5μL）或含有氣泡；
光纖端面污染或劃傷。
解決方法：
用移液器輕觸上臂，使液滴在上下檢測(cè)面間形成穩(wěn)定“液橋”；
確保加樣量≥1μL，緩慢釋放避免氣泡；
每次使用前后用無(wú)絨布蘸無(wú)水乙醇擦拭上下檢測(cè)面，禁用紙巾或丙酮。
二、A260/A280比值異常（如DNA＜1.7，RNA＜2.0）
原因分析：
蛋白質(zhì)或酚類殘留污染（比值偏低）；
樣品稀釋液非匹配緩沖液（如用水代替TE）；
檢測(cè)面殘留前次樣品交叉污染。
解決方法：
重新純化樣品（如柱純化或氯仿抽提）；
使用與樣品制備相同的緩沖液作為空白（如10mMTris,pH8.0）；
執(zhí)行“Blank”校準(zhǔn)后立即檢測(cè)，避免空氣污染物沉積。
三、重復(fù)性差（同一樣品RSD>5%）
原因分析：
移液器未校準(zhǔn)或操作手法不一致；
環(huán)境濕度低（<30%），液滴快速蒸發(fā)；
樣品本身不均一（如未混勻或含顆粒）。
解決方法：
使用經(jīng)校準(zhǔn)的低吸附吸頭，垂直加樣；
在濕度40–60%環(huán)境中操作，或加蓋防蒸發(fā)罩（部分機(jī)型支持）；
檢測(cè)前渦旋混勻，離心去除顆粒。
四、基線漂移或背景噪聲高
原因分析：
光源老化或光纖污染；
空白未正確校準(zhǔn)（如用臟水或錯(cuò)誤緩沖液）；
強(qiáng)光直射檢測(cè)窗口。
解決方法：
每日開機(jī)后執(zhí)行空白校準(zhǔn)；
避免陽(yáng)光或強(qiáng)燈光直射儀器；
若基線持續(xù)異常，運(yùn)行儀器自檢程序或聯(lián)系工程師校準(zhǔn)光源。
更新時(shí)間：2026-02-03
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實(shí)驗(yàn)室常規(guī)儀器